Human SHH (C24II)
Overview ソニック・ヘッジホッグ(Sonic hedgehog : SHH) は、細胞培養や分化研究、ファンクショナルアッセイに最適な組換えタンパク質です。 Human SHH (C24II) は、様々な細胞、特にヒトおよびマウスの胚性幹 (ES) 細胞、また成体幹細胞や間葉系細胞などの増幅、分化に使用できます。 Details Background information SHH は 神経発生、四肢形成、造血、消化管形成など、胚発生に広く関与しています。ヘッジホッグファミリーに属する因子は、形態形成因子としての役割のほか、マイトジェン、細胞生存因子、軸索誘導因子としても作用し、また成体における組織再生に影響することが示されています。SHHは前駆体として合成され、19 kDaのN末端ドメイン (SHH-N) と25 kDaのC末端ドメイン (SHH-C) に自己消化により分解されます。SHH-Nはヘッジホッグタンパク質のシグナル伝達活性を担うのに対し、SHH-Cはコレステロール転移酵素として作用し、SHH-Nにコレステロール分子を共有結合により付加します。この脂肪修飾型のSHH-Nは、より強い活性を示します。ヒトSHH (C24II) は成熟型SHH-Nドメインに相当し、システイン (Cys) 残基がイソロイシン-イソロイシン (Ile-Ile) 残基に置換されて脂溶性部分を有しています。 Quality description Research-gradeのサイトカインは様々な種類の細胞培養に最適な品質で、凍結乾燥の前にフィルター滅菌されています。通常、含有エンドトキシン濃度は0.1 ng/μg（1 EU/μg）以下、また95%以上の純度を有しています。生物活性は適切な生物検定において試験されています。 Premium-gradeのサイトカインは高い生物活性とその厳格な保証が特徴で、精密な使用ユニットが要求されるアプリケーションに最適です。生物活性はロットごとに凍結乾燥後にreconstitutionして計測し、可能な場合はWHO/NIBSC 基準物質による標準化を行っております。一般にエンドトキシンレベルは<0.01 ng/µg (<0.1 EU/µg)、 純度は >97%で、ロットごとに活性保証書の発行が可能です。（macs@miltenyibiotec.jp までお問い合わせ下さい）		Figure 1 Neural precursors, derived from mouse embryonic stem cells, were expanded in MACS Neuro Medium containing N2-supplements, laminin, Human FGF-2 (10 ng/mL), Human SHH (C24II) (200 ng/mL), and FGF-8b (100 ng/mL). Subsequently cells were grown in MACS Neuro Medium complemented by B27 supplements and ascorbic acid (200 µM) for final differentiation into neurons. Cells were analyzed by immunocytochemistry for TuJ1, TH, and GAD67 expression. 1: TH (tyrosine hydroxylase)+ cells 2: TuJ1 (neuron-specific β-III tubulin)+ cells 3: GAD67 (glutamate decarboxylase)+ cells Figure 2 Human SHH (C24II) activity assay. The biological activity of Human SHH (C24II) was determined by alkaline phosphatase assay using mouse C3H10T1/2 fibroblasts. Figure 3 SDS-PAGE of Human SHH (C24II), premium grade under reduced (R) and non-reduced (NR) conditions.

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