Neurosphere Dissociation Kits

Overview

Neurosphere Dissociation Kits は、neurosphere より単細胞懸濁液をマイルドかつ効率的に調製するために開発されました。マイルドな酵素分解処理により、1時間以内に高い効率で多数の生細胞を得ることが出来ます。
調製された細胞は、MACS^® Technology による細胞分離や、細胞培養・増幅、フローサイトメトリー解析、蛍光顕微鏡による解析、分子生物学的解析などの、in vitro およびin vivoのアプリケーションに使用できます。

Details

Background information
Neurospheres は、神経幹細胞を至適条件下で培養することで形成される、非接着性の球形の細胞塊です。効果的な分散は、効率的な継代および続くアプリケーションに重要です。

パパインで消化される抗原エピトープもあれば、トリプシンで消化されるものもあります。パパインベースのキットは Anti-Prominin-1 MicroBeads、CD11b (Microglia) MicroBeads 、Anti-A2B5 MicroBeads による細胞分離に、一方、トリプシンベースのキットはAnti-GLAST (ACSA-1) MicroBead Kit 、 Anti-PSA-NCAM MicroBeads による細胞分離に適しています。
各キットのエピトープへの影響に関しては、Figure 2 をご覧ください。

Further information

Neuroscience research brochure
[PDF; 1,7 MB]

Figure 1

Mouse whole brain was dissociated using the Neural Tissue Dissociation Kit (P) and the gentleMACS™ Dissociator. Neural stem cells (NSCs) were isolated via Anti-Prominin-1 MicroBeads and subsequently cultivated in MACS® Neuro Medium supplemented with MACS Supplement B27 PLUS, penicillin/streptomycin, 2 mM L-glutamine, 20 ng/mL human EGF and FGF-2. A) Primary neurospheres formed by the NSCs after one week in culture. B) Single-cell suspension after dissociation of primary neurospheres using the Neurosphere Dissociation Kit (P). C) Secondary neurospheres formed one week after dissociation.

Figure 2

Antigen compatibility of Dissociation Kits.
For many applications, including MACS Cell Separation, it is crucial to conserve the integrity of particular cell surface epitopes during tissue dissociation. The table shows which kits conserve which specific epitopes. Epitope sensitivities have been tested using Miltenyi Biotec's antibodies if available.