μMACS™／MultiMACS™ cDNA Synthesis Kits
1ステップ反応： MACS® Technology による mRNA の分離とカラム内の逆転写反応により、細胞、組織あるいは血液から直接、cDNA が得られます。 高感度の解析： 敏速な手順でサンプルのロスが少ない μMACS™ の方法により、少ない細胞数での解析を可能とします。 3つのキットが１つに： 最大 107 個の細胞まで、 mRNA の磁気分離、cDNA の合成および精製が可能です。 Ready-to-use：キット付属の MACS 試薬と MACS Column Technology により、cDNA の合成が非常に簡便になります。 純度の高いcDNAが1ステップで： RNA の分離と引き続き行う 1st cDNA 合成はそれほど容易ではありませんでした。μMACS™ One-step cDNA Kit は、効率の良い mRNA の磁気分離と、革新的なカラム内 cDNA 合成を組み合わせています。mRNA を磁気標識しカラムに保持させた状態で、逆転写反応と精製を行なうことにより高純度の cDNA を溶出できます。この過程は９０分で完了します。 90分でcDNA合成 ：Figure 1 で示されている実験過程は、MACS® Technology の２つの特長を利用しています。１つ目の特長は、きわめて微小な Oligo(dT) MicroBeads （直径 50 nm） を用いて、真核生物由来 mRNA の poly(A)+ tail を効果的に標識できることです。アニーリングの反応時間を必要としません。 µ Columns を用いることで、磁気標識されたmRNAを効果的に洗浄し処理することができます。 そのため、細胞や組織あるいは血液から直接 mRNA の精製と逆転写 (RT) を連続して行うことが出来ます。2つ目の特長は、MACS Technology の簡便な手順が、このキットにも活かされていることです。ライセートから不要物を除くための遠心1回後は、逆転写反応はすぐに使える酵素ミックスでセットアップ済みなので、数回のピペッティング操作が必要になるだけです。 種々のアプリケーションに応用可能： mRNA は total RNA の 1 - 5 % しか存在しませんが、mRNA を用いて解析することで total RNA を用いた場合に比べ多くの場合、有意に優れた結果を得ることが出来ます。分離したmRNA を使用すると、Northern blots においてより強いバンドを得ることができ、マイクロアレイのハイブリダイゼーションや 定量的 PCR ではより明瞭な結果を得ることが出来ます。 特に、バイオプシーや希少な細胞、分離した細胞サブセットなどの限定されたサンプルでは、正確で高感度な解析が極めて重要になります。そのため、μMACS One-step cDNA Kit は、数個の細胞から 107 個までの細胞、30 mg の動物組織、100 mg の植物組織、あるいは 200 μg の total RNA に同じ様に用いることができます。 高品質のcDNA：cDNAの量、純度、完全長度などが多くの実験応用の質を決定します。MACS Column Technology と敏速な1ステップの手順により、mRNA のコンタミやサンプルをロスする危険を最小限に抑えます。 温度制御できる thermoMACS™ Separator の強力な磁場にμ Columnを取り付けることで、カラム内に正確な逆転写反応温度をすばやく調整することが出来ます。µMACS One-step cDNA Kitと組み合わせることによって、一度に４サンプルを並行処理することが可能です。 多数のPCRサンプルを調製する場合は、MultiMACS M96thermo SeparatorとMultiMACS cDNA Synthesis Kitsを組み合わせてお使い下さい。簡単に96ウェルフォーマットへとスケールアップできます。この超小型卓上装置は、手動で操作することも可能です。また、分注ロボットシステムに組み込んで全自動で操作することも可能です。 Columns μ Columns （μMACSキットに含む） Multi-8/96 Columns (MultiMACSキットに含む) Further information RNA research brochure [PDF; 2,4 MB] Isolation of mRNA from stablized whole blood [PDF; 111,3 KB] Average RNA yields [PDF; 66 KB]		Figure 1 Principle of MACS® Technology for one-step mRNA isolation and cDNA Kit Figure 2 mRNA isolation and cDNA synthesis from 500 and 5 Jurkat cells (A). Analysis by PCR amplification of GAPDH fragment (B). A: mRNA was isolated and reverse transcribed into cDNA by μMACS One-step cDNA Kit (a: 500 cells; b: 5 cells) or by conventional tube methods (c: 500 cells; d: 5 cells). e: non-template control. 10% of each cDNA was analyzed by quantitative PCR using intron-spanning primers. B: μMACS One-step cDNA synthesis (lane 1 and 2: 500 Jurkat cells; lane 3 and 4: 5 Jurkat cells, M: 100 bp ladder). 50% of each cDNA was used in a standard PCR reaction. A 372 bp fragment of GAPDH was amplified with intron-spanning GAPDH primers (genomic DNA would give a 476 bp fragment) and analyzed by agarose gel electrophoresis.

サイト内検索

高度な検索