μMACS™ mRNA Isolation Kits
mRNA精製が15分で： きわめて微小な μMACS™ Oligo(dT) MicroBeads で効果的に磁気標識することにより、細胞や組織、血液から直接、純度の高い mRNA を精製できます。前もって total RNA を調製する必要はありません。 最高級の純度： 磁気標識された mRNA は MACS® Column に保持される一方、不純物であるタンパク質、ゲノム DNA、リボソーム RNA は効果的に洗浄出来ます。そのため、高純度の mRNA が高い回収率で再現性よく得られます。 簡便で安全： ユニークな MACS Column Technology と、有害成分を含まない、すぐに使用可能な試薬を用いて、微量なサンプルや単離が難しそうなサンプルからでも、intact な mRNA の回収が容易に行えます。 高感度の遺伝子発現プロファイル：RT-PCR やマイクロアレイ解析、cDNA ライブラリーの作成など一連の実験には、高純度の RNA の精製が求められます。研究対象の要は、total RNA の 1 - 5 % しか存在しない mRNA であるにもかかわらず、既存の mRNA 分離法は時間がかかり扱いにくいために、total RNA がよく使われます。しかし、mRNA を出発材料にすると、実験結果の感度や特異性は格段と向上します。出発材料が限られていたり、痕跡程度に発現するmRNAを解析する場合、このことが特に重要になります。μMACS™ mRNA Isolation Kits は、既存の total RNA の分離法よりも迅速かつ高感度の mRNA 分離を可能とします。 直接分離法： MACS® Technology により、全血やtotal RNA1,9 などだけでなく、新鮮組織1,2 、凍結組織、MACS で分離した細胞1,2、培養細胞3、動物や植物の組織3-8など様々な生物材料から直接、高純度のの mRNA 分離が可能となります。生物材料からtotal RNAを抽出してからmRNA を精製する2ステップ法が好まれる場合でも、μMACS mRNA Isolation により total RNA から高純度の mRNA を分離できます。 ユニークなMACS Column Technology：細胞を溶解し細胞ライセートの不溶物を除いた後、mRNA の磁気標識を行います。μMACS Oligo(dT) マイクロビーズ （直径 50 nm）は微小なため、mRNA の poly(A ) tail とのアニーリングが数秒で完了します。このMACS磁気マイクロビーズは、短い poly-A-tail のmRNAを含めて、細胞ライセート中の mRNA を効率よく磁気標識します。標識ｍRNAがセパレーターにセットしたMACS Column 内に磁気的に保持されると、付属のバッファーを加えるだけで mRNA は効果的に洗浄されます。そのため、MACS 分離された mRNA には、タンパク質、リボソーム RNA、ゲノム DNA がほとんど存在しません。ピペット操作の反復は省略されるので、MACS Column Technology によりサンプルのロスを最小限に抑えることができます。最終的に、MicroBeads のみをカラムに残したまま、次の実験ステップに便利な少ない液量で溶出することが出来ます。 この μMACS mRNA 分離は、Guanidinium-isothiocyanate での溶解もフェノール抽出も必要ない、毒性化合物を使わない方法です。ゲノムDNAの除去 や後の酵素処理なども、μ Column 内で行うことが出来ます。カラム内での 1st　cDNA 合成に関しては、μMACS One-step cDNA Kit の項をご参照ください。 Columns μ Columns 又は M Columns (キットに含まれる) Further information RNA research brochure [PDF; 2 MB] Isolation of mRNA from yeast cells [PDF; 74,4 KB] µMACS™ mRNA Isolation Kits – short protocol [PDF; 103,4 KB] Isolation of mRNA from stablized whole blood [PDF; 111,3 KB] Average RNA yields [PDF; 66 KB] Homogenization of tissue for mRNA isolation [PDF; 70 KB]		Figure 1 Principle and time schedule for µMACS™ mRNA Isolation Kits (and µMACS One-step cDNA Kit). Figure 2 Elution diagramm of mRNA isolated with μMACS Technology (red) or latex resin (green) from 200 μg total RNA of mouse spleen (Bioanalyzer 2100, Agilent Technologies). Figure 3 mRNA isolated from cells or tissue. mRNA was directly isolated from human peripheral blood lymphocytes (lane 1), monocytes isolated with CD14 MicroBeads (2), hybridoma cells (3), CHO cells (4), mouse spleen (5), mouse lung (6), mouse kidney tissue (7), and from leaves of Forsythia viridissima (8). M: RNA marker. Figure 4 RT-PCR of mRNA isolated from whole blood. An 838 bp fragment of ß-actin was amplified in an one-step RT-PCR using mRNA isolated from 200 μL (lane 1), 100 μL (3), or 50 μL (5) whole blood. As a negative control, PCR was performed with the respective mRNA preparations in the absence of reverse transcriptase (2, 4, and 6).

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