μMACS™ SuperAmp™ Kit
Simplify & amplify! 1個の細胞からでも遺伝子発現プロファイリング µMACS™ SuperAmp™ Kit は、非常に高感度なmRNA単離、cDNA合成、そしてmRNA-由来のcDNAをグローバルPCR反応によって百万倍にも増幅をかけることを可能にしたキットで、1–10,000個の細胞もしくはそれに対応する組織からスタートすることが可能です1。 SuperAmp テクノロジーの原理 定評のあるMACS® Technologyに基づいて、常磁性体oligo(dT) MicroBeadsを用いてmRNAを単離します。ユニークなカラム内cDNA合成反応により、サイズの揃ったcDNA断片を生成します。全てのcDNA断片の3’端にテール配列付加を行い、シングルプライマーを用いたグローバルPCRにより増幅します。最後に、増幅したDNA断片を、Klenow標識反応によりラベルします。 こちらをクリックしてイラストをご覧下さい→µMACS™ SuperAmp™ テクノロジーの原理 同じテクノロジーが既にミルテニーバイオテク社の SuperAmp™ マイクロアレイサービスにおいて使用され、論文にも報告されています2-8。 どんなタイプの希少細胞からでもスタートできます: – 細胞株 – MACS® Technologyで分離した細胞 – フローサイトメトリー法で分離した細胞 – バイオプシーした組織 – レーザーキャプチャー法で微小組織から切り出した細胞 ユニークなSuperAmp™ テクノロジーで可能になること: • 超高感度 極小で超常磁性体であるMACS® MicroBeadsは、少量サンプル中のmRNA分子に素早く結合します。一方、MACS® カラムテクノロジーによって効率の良い洗浄ステップを簡単に行うことが出来、たとえ極少量のサンプルからであっても高い純度のmRNAを得ることが可能です。このユニークなワンステップmRNA単離とカラム内cDNA合成操作により、チューブからチューブへとサンプルを移し変える際に見られるようなサンプルのロスを減らすことが出来ます。 • 高い再現性 注意深く最適化された逆転写(RT)プロトコールにより、小さな first-strand cDNA断片を一定の長さで生成します。これにより、次の増幅操作におけるPCRバイアスを低くします。さらに、全ての転写物に対して、シングルプライマーを用いて同じアニーリング条件でグローバルPCR増幅をおこなうことにより、PCRバイアスを避けています。 • 時間と労働力の節約 この信頼できるSuperAmp™テクノロジーは、2回のT7増幅よりもさらに早く行うことが出来ます：細胞を溶解し、DNAを増幅、標識、精製するまで、操作時間はたった10時間です。 SuperAmp サンプル輸送 SuperAmp Shipment Buffer Kit は、µMACS SuperAmp KitによるmRNAの増幅に用いる、分解され易いサンプルを安全に輸送するために開発されました。 SuperAmp Shipment Buffer Kit に含まれるSuperAmp Shipment Bufferにより、非常に効果的な細胞溶解と輸送のためのサンプルの安定化が可能です。 Columns µ Columns (キットに含まれる) Further information SuperAmp Kit flyer [PDF; 151,9 KB] Customer report SuperAmp Kit [PDF; 217 KB] Increase sensitivity of Illumina® Beadarray™ using μMACS™ SuperAmp™ Technology [PDF; 212,6 KB] RNA research brochure [PDF; 2,4 MB]		Figure 1 Demo request: Are you interested in testing the unique μMACS™ SuperAmp™ Technology? Please click here to request a demo in your lab! Figure 2 Reliability of the µMACS™ SuperAmp™ Protocol using cell lines. A serial dilution of 1–10,000 Jurkat cells was generated and each dilution was independently processed using the µMACS™ SuperAmp™ Kit. The amplified and Cy5-labeled cDNA from Jurkat cells was hybridized in a two-color microarray experiment against amplified and Cy3-labeled cDNA from 1000 Raji cells. Each experiment was repeated thrice and the independently amplified samples were hybridized on PIQOR™ Immunology Microarrays. A: Pearson correlation coefficients (r) of independent repeats. B: Hierarchical clustering with no obvious grouping of repeats or cell numbers. Figure 3 Reliability of the µMACS™ SuperAmp™ Protocol using primary cells. CD14+ cells were separated from 5 x 107 peripheral blood mononuclear cells to a purity of 98% using MACS® Technology. A serial dilution of 5-10,000 CD14+ cells was generated and each dilution was independently processed using the µMACS™ SuperAmp™ Kit. The amplified and Cy5-labeled cDNA from CD14+ cells was hybridized in a two-color microarray experiment against amplified and Cy3-labeled cDNA from 1000 Raji cells. Each experiment was repeated thrice and the independently amplified samples were hybridized on PIQOR™ Immunology Microarrays. A: Pearson correlation coefficients (r) of the three independent repeats. B: Hierachical clustering with no obvious grouping of repeats or cell numbers.

サイト内検索

高度な検索