CD303 (BDCA-2) 抗体 (ヒト)

Overview

CD303 (BDCA-2) 抗体を用いることで、血液、リンパ組織または非リンパ組織の CD303 (BDCA-2)⁺ plasmacytoid DCを、免疫蛍光(免疫化学)染色およびフローサイトメトリー解析により同定することができます^1,3,5-11。この抗体は、新鮮な細胞浮遊液あるいはホルムアルデヒド固定した細胞浮遊液の染色にも、風乾してアセトン固定した凍結切片などの染色にも適しています^3,5。CD304 (BDCA-4/Neuropilin-1) MicroBead Kitを使用してplasmacytoid DCを分離した場合には、CD303 (BDCA-2) 抗体で染色してフローサイトメトリー解析を行うことをお勧めします³。

Details

Background information
CD303 (BDCA-2) 抗体は、健常者や HIV 感染者の全血中の plasmacytoid DCの同定、解析に、またHIV の感染や伝播における DC-SIGN の機能の解析に使用されました^7,11。また CD303 (BDCA-2) 抗体は、造血幹細胞動員⁸あるいは移植¹⁰の前後において、血液や骨髄サンプル中の plasmacytoid DCの同定と解析にも使用されました。さらに免疫化学組織染色にも使われており、その例として、種々の炎症性皮膚疾患の患者組織のplasmacytoid DCの同定などが挙げられます^{5, 12,13}。
CD303 (BDCA-2) 抗原^1,3は、ヒトの血液、リンパ組織（扁桃や骨髄）および非リンパ組織において、plasmacytoid DCに限定して発現しています^3,6。この特異的な発現により、ただ１つのマーカーでplasmacytoid DCを同定することが可能です^1-11。血液と骨髄の CD303 (BDCA-2)⁺ plasmacytoid DCは、CD11c⁻, CD123^high, CD4⁺, Lin⁻, CD45RA⁺, CD304 (BDCA-4/ Neuropilin-1)⁺, CD141 (BDCA-3)^low, CD1c (BDCA-1)⁻, CD14⁻, CD2⁻ という表現型を示し、骨髄細胞系列マーカー (CD13、CD33) も Fc レセプター (CD32, CD64, FcεRI) も発現していません^1,6。CD303 (BDCA-2) は、単離した直後の plasmacytoid DC には強く発現していますが、培養を行うと 48 時間以内にダウンレギュレートされます¹。CD304 (BDCA-4/ Neuropilin-1) と異なり、CD303 (BDCA-2)の発現は、単球や造血前駆細胞から ex vivo で分化誘導した CD1a⁺ 樹状細胞には認められません^1,9。
CD303 (BDCA-2) は、新規のII 型膜貫通 C -タイプレクチンです³。注目すべきことに、 Plasmacytoid DCは、CD303 (BDCA-2) を介してリガンドを取り込み、さらにそれを分解して T細胞に提示することができます^1,3。CD304 (BDCA-4) への抗体の結合とは異なり、CD303 (BDCA-2) に抗体が結合すると、plasmacytoid DCからのインフルエンザウイルスなどにより誘導される I 型 IFN の産生が抑制されます^3,6。

Cross-reactivity

クローンAC144は下記との交差性があります。

カニクイザル (Macaca fascicularis)

アカゲザル(Macaca mulatta)の細胞とは反応しません

Clone	Isotype
AC144	Mouse IgG1

Figure 1

Human PBMCs were stained with CD303 (BDCA-2), lineage marker (CD3, CD16, CD14, CD19, CD20, CD56), CD123, and CD11c antibodies. Flow cytometric analysis confirms that CD303 (BDCA-2)⁺ plasmacytoid dendritic cells are Lin^–, CD123⁺ and CD11c^–, and that CD303 (BDCA-2) is exclusively expressed on plasmacytoid dendritic cells.

Figure 2

Direct identification of plasmacytoid dendritic cells in cryosections of tonsils by immunofluorescent staining. Sections were stained with CD303 (BDCA-2)-FITC (green) and non-conjugated monoclonal antibody against CD123 (A), CD20 (B), CD8 (C) or HLA-DR (D), respectively. Staining with non-conjugated monoclonal antibodies was revealed by secondary staining with biotinylated anti-isotype antibodies and Texas red-conjugated streptavidin (red).

Figure 3

PBMCs from cynomolgus monkey (Macaca fascicularis) were stained with CD303 (BDCA-2)-APC and Anti-HLA-DR-FITC and analyzed by flow cytometry.

PBMCs from cynomolgus monkey (<i>Macaca fascicularis</i>) were stained with CD303 (BDCA-2)-APC and Anti-HLA-DR-FITC and analyzed by flow cytometry.