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| Description |
CD154 Microbead Kitは、ヒトPBMCsから、活性化したCD154+ 抗原特異的CD4+ T細胞をポジティブセレクションするために開発されました。 CD154+ T細胞は、CD154-Biotin抗体とAnti-Biotin MicroBeadsで間接的に磁気標識されます。 |
| Details |
Background information CD154抗体は、CD40L, gp39, T-BAM, TRAP又はLy-62としても知られる39 kDaの膜貫通型糖タンパク質、ヒト CD154抗原を特異的に認識します。CD154は活性化 CD4+ T細胞において一過的にアップレギュレートされ、CD40と結合することによりT細胞/抗原提示細胞の相互作用に共刺激分子として重要な役割を果たしています。活性化後数時間という一過的な発現のため、CD154は、活性化した抗原特異的CD4+ T細胞のマーカーとして使用することができます1。 抗原提示細胞上のCD40と相互作用することにより、CD154発現はダウンレギュレートされますが、刺激時にCD40阻害抗体を添加しておくことにより、これを防ぐことができます。 |
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| Figure 1 |
CD154+ T cells from PBMCs of a CMV+ donor were separated using the CD154 MicroBead Kit, two MS Columns, and a MiniMACS™ Separator. PBMCs were stimulated for 16 hours with CMV pp65 – Recombinant Protein, and a CD40 blocking-antibody was added during the stimulation to prevent downregulation of CD154. Subsequently, CD154+ T cells were separated using the CD154 MicroBead Kit and stained with Anti-Biotin-PE and CD4-FITC. |
| CMV pp65–stimulated sample |
| A: Before separation |
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| B: After separation |
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| Unstimulated control |
| C: Before separation |
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| D: After separation |
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| References |
| 1. Frentsch, M. et al. (2005) Nat. Med. 11: 1118-1124. |
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