CD4+ Recent Thymic Emigrant アイソレーションキット
Description CD4+ Recent Thymic Emigrant Isolation Kitは、ヒトPBMCsからCD4+CD45RA+CD31+ recent thymic emigrants (RTE) 細胞を分離するために開発されました。 この分離は、２ステップで行います。 Details Background information RTEsは、細胞内にT cell receptor excision circles (TRECs)を含むという特徴を持つ、ナイーブT細胞の亜集団です。 CD4+ T細胞でのCD31 (platelet endothelial cell adhesion molecule-1, PECAM-1)の発現と、TREC含有量が相関するため、ナイーブCD4+ T細胞集団におけるCD4+ RTEsを同定するためのマーカーとしてCD31が報告されました¹。CD31の発現を欠くCD4+ T 細胞は、TRECsをまったく含有していないか、ごく微量の含有量であり、これは、その細胞が末梢において既に増殖したことを示唆しています。 このため、CD4+ RTEsの磁気分離は、非標識ナイーブ CD4+ T 細胞を前濃縮した後に、CD31+ 細胞を直接分離することで可能となります。 Detailed separation procedure 分離は、2ステップで行います。まず、non-CD4+ T細胞と メモリーCD4+ T細胞を、ビオチン標識抗体カクテルとAnti-Biotin MicroBeadsで間接的に磁気標識します。標識した細胞をMACS® Columnにかけて除去します。次のステップでは、前濃縮したCD4+ T 細胞画分中の CD4+CD45RA+CD31+ RTEsを、CD31 MicroBeadsで直接標識してポジティブセレクションします。 Columns ステップ１の磁気分離（ディプリーション）: LS 又は autoMACS Columns ステップ２の磁気分離（ポジティブセレクション）: LS, MS 又は autoMACS Columns		Figure 1 Isolation of CD4+ RTEs from PBMCs using the CD4+ Recent Thymic Emigrant Isolation Kit, an LS Column, and an MS Column. To evaluate the isolation of CD4+ RTEs, PBMCs before separation and the isolated CD4+ RTEs were fluorescently stained with CD4, CD45RA, and CD31 antibodies and analyzed by flow cytometry. PBMCs before separation gated on CD4+CD45RA+ cells CD4+ RTEs gated on CD4+CD45RA+ cells

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