Double-negative T Cell アイソレーションキット
Description Double-negative T Cell Isolation Kitは、PBMCsからdouble-negative T細胞 (CD4–CD8–CD56–CD3+TCRα/β+ 細胞) を分離するために開発されました。この分離は、2ステップの操作で行います。 Details Background information Regulatory T細胞による免疫反応のダウンレギュレーションは、免疫寛容の誘導に重要な役割を果たしています。TCRα/β+ CD4–CD8– double-negative T細胞も、アロ（同種異系）抗原に対する免疫反応を特異的にダウンレギュレートする能力を持つという報告が、ヒトとマウスの両方において最近なされました。Double-negative T細胞は、リンパ組織と同様に非リンパ組織においても見られ、また末梢の CD3+ 細胞の約1–3% を占めます。Double-negative T細胞は、抗原提示細胞のallo-MHCペプチド複合体を認識できると言われています。 Detailed separation procedure この分離は、2ステップで行います。まず不必要な TCRα/β+ 細胞を全て除去するため、CD4+, CD8+, CD56+ 細胞を間接磁気標識してディプリーションします。同時に Anti-TCRα/β-PE 抗体による標識を行います。ステップ2では、濃縮されたdouble-negative T細胞を含むフロースルー画分をAnti-PE MicroBeadsと共にインキュベートし、目的の細胞をポジティブセレクションによって分離します。 Columns ステップ１の磁気分離（ディプリーション）: LD 又は autoMACS Columns ステップ２の磁気分離（ポジティブセレクション）: MS 又は autoMACS Columns		Figure 1 TCRα/β+CD4–CD8– double-negative T cells were isolated from human PBMCs by using the Double-negative T Cell Isolation Kit, one LD Column and two MS Columns, a MidiMACS™ and a MiniMACS™ Separator. Cells were additionally fluorescently stained with Anti-Biotin-FITC. A: PBMCs before separation B: Pre-enriched double-negative T cells after depletion of CD4+, CD8+, and CD56+ cells C: Isolated double-negative T cells

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