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| Anti-PTK7 (CCK-4) マイクロビーズキット |
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| Overview |
| Anti-PTK7 (CCK-4) MicroBead Kitは、ヒトの末梢血単核細胞 (PBMCs) および骨髄単核細胞 (BM-MNCs) から PTK7+細胞を分離するために開発されました。 |
| Details |
Background information 抗PTK7モノクローナル抗体188Bは、ヒトprotein tyrosin kinase-7 (PTK7) を認識します。PTK7はcolon carcinoma kinase-4 (CCK-4) としても知られており、触媒としては不活性なチロシンキナーゼ・ドメインを持つ、receptor protein tyrosin kinase (RPTK) 様の分子です1,2。PTK7 mRNAは、ヒトの正常メラノサイト、結腸癌細胞、肺、肝臓、膵臓、腎臓ならびに胎盤の組織で検出されます。最近、特異的モノクローナル抗体188Bを用いることにより、PTK7 が血中や骨髄中のCD303 (BDCA-2)+ plasmacytoid dendritic cells, CD141 (BDCA-3)high type-2 myeloid dendritic cellsならびに CD34+ 造血前駆細胞 (HPCs)で発現していることが示されました。PTK7の発現は初期HPCs (CD34+ CD133+) でも、後期HPCs (CD34+ CD133-) でも検出されました。扁桃腺では、PTK7は一部のT細胞にも検出されています。
Applications 血液や体液(気管支洗浄液など)、もしくは骨髄や組織(リンパ組織や腫瘍組織など)の単細胞懸濁液から、PTK7 (CCK-4)+ 細胞をポジティブセレクションまたはディプリーションできます。 たとえば、PBMCsやBMMNCsからPDCs, MDC2sそして HPCsを同時に分離する場合や、CD1c (BDCA-1)+ Cell Isolation Kitと組み合わせて、すべての血中樹状細胞(PDCs, MDC2s, CD1c (BDCA-1)+ type-1 myeloid dendritic cells)とHPCsを同時に分離する場合に、このキットを使用することが出来ます。 Anti-PTK7 (CCK-4) MicroBead Kit は、たとえば扁桃からのPDCsの分離のようにCD304 (BDCA-4/Neuropilin-1) MicroBead Kitが使用できない場合のPDCsの分離に、あるいはCD34 MicroBead Kitが使用できない場合のHPCsの分離などに使用することが出来ます。 |
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| Figure 1 |
| Isolation of PTK7 (CCK-4)+ cells from PBMCs using the Anti-PTK7 (CCK-4) MicroBead Kit and a MiniMACS™ Separator with MS Columns. Aliquots are fluorescently stained (A) before and (B) after magnetic separation with CD34-FITC, CD303 (BDCA-2)-PE and CD141 (BDCA-3)-APC for identification of hematopoietic stem cells (HPCs), plasmacytoid dendritic cells (PDCs), and type-2 myeloid dendritic cells (MDC2), respectively. Before and after separation, cells were gated on R1 (PDCs), R2 (HPCs), and R3 (MDC2s). Due to specific expression of CD303 (BDCA-2), CD141 (BDCA-3), and CD34 there is no overlap between the different PTK7-expressing cell types, and PDCs, HPCs, and MDC2s are clearly discriminated. |
| A) Before magnetic separation |
| Identification of PDCs and HPCs |
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| Identification of MDC2s |
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| Discrimination between PTK7-expressing cell types |
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| B) Enriched PTK7 (CCK-4)+ cells |
| Identification of PDCs and HPCs |
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| Identification of MDC2s |
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| Discrimination between PTK7-expressing cell types |
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| References |
| 1. Mossie et al. (1995) Oncogene 11: 2179–2184. |
| 2. Park et al. (1996) J. Biochem. 119: 235–239. |
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