ダイアモンド Plasmacytoid Dendritic Cell アイソレーションキットⅡ (ヒト)
Overview Diamond Plasmacytoid Dendritic Cell Isolation Kit II は、最高純度のPDC集団を得るためのキットです。2段階で分離を行うキットで、最初にPDCs以外の細胞を除去し、次にPDC-特異的抗原CD304 (BDCA-4/Neuropilin-1)に対するMicroBeadsを用いてポジティブセレクションします。 この製品は、第一世代のDiamond Plasmacytoid Dendritic Cell Isolation Kit (# 130-092-402) の改良版であり、プロトコールが短くなったばかりでなく、分離性能もさらに高まりました。 Details Background information 分離したPDCsの表現型は、CD303 (BDCA-2)+, CD304 (BDCA-4/Neuropilin-1)+, CD123+, CD4+, CD45RA+, CD141 (BDCA-3)dim, CD1c (BDCA-1)–, CD2–　です。この細胞は、 リネージマーカー (CD3, CD14, CD16, CD19, CD20, CD56) の発現が欠落しており、CD13, CD33といったミエロイドマーカーや、CD16, CD64, FcεRIといったFcレセプターも発現していません。 CD304 (BDCA-4/Neuropilin-1)抗原への抗体の結合は、PDCsにおけるtype I IFN産生に有意な影響を与えません。これは、別のPDC-特異的抗原CD303 (BDCA‑2)に対する抗体の結合が影響を与えるのと対照的です1, 2。 Detailed separation procedure 最初のディプリーションステップでは、non-PDCsを、ビオチン標識抗体カクテルと、Anti-Biotin MicroBeadsをはじめとする特異的マイクロビーズカクテルを用いて磁気標識します。続いてのポジティブセレクションステップでは、濃縮PDCsをCD304 (BDCA-4/Neuropilin-1) Diamond MicroBeadsで磁気標識します。 Downstream applications Diamond Plasmacytoid Dendritic Cell Isolation Kit II は、PBMCsから最高純度のPDCsを分離できるように開発されました。そのため、PDC特異的な遺伝子発現プロファイリングやタンパク質精製のような、非常に高い純度のPDC集団が必要とされるような場合に特に有用です。 Columns ステップ１のディプリーションには: LD 又は autoMACS Columns ステップ２のポジティブセレクションには: MS, LS, 又は autoMACS Columns		Figure 1 Isolation of PDCs from PBMCs using the Diamond Plasmacytoid Dendritic Cell Isolation Kit II, an LD Column and a MidiMACS™ Separator, as well as a MiniMACS™ Separator and two MS Columns. Cells were stained with CD303 (BDCA-2)-APC and CD123-PE. Like CD304 (BDCA-4/Neuropilin-1), the CD303 (BDCA-2) antigen is specifically expressed on PDCs in blood and allows their direct identification. PBMCs before separation Enriched PDCs after depletion of non-PDCs Pure PDCs after positive selection with CD304 (BDCA-4/Neuropilin-1) Diamond MicroBeads

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